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     隨著微生物制劑在養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用發(fā)展，養(yǎng)殖戶已經(jīng)越來(lái)越認(rèn)識(shí)到使用微生物制劑所帶來(lái)的好處和效益，與此同時(shí)，微生物制劑與酶制劑等生物制劑對(duì)我國(guó)綠色無(wú)公害養(yǎng)殖事業(yè)的貢獻(xiàn)也越來(lái)越顯著，這些生物制劑，不僅可以提高動(dòng)物的生長(zhǎng)繁殖性能，提高抗病力和免疫力，提高飼料報(bào)酬，增強(qiáng)養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)效益，還可以改善環(huán)境，減少環(huán)境污染，減少甚至杜絕（指發(fā)酵床養(yǎng)殖技術(shù)）糞尿的排放量，更重要的是，還可以減少飼料中抗生素的使用量，甚至完全取消抗生素在飼料中的添加使用，是利國(guó)利民的環(huán)保產(chǎn)品。

    但大多數(shù)養(yǎng)殖戶對(duì)微生物制劑、酶制劑的含量表達(dá)方式，或者說(shuō)單位含量表達(dá)，并不太了解，造成了很多的誤解和盲目，下面將這一問(wèn)題作一個(gè)詳細(xì)的介紹：

 

     常用的微生物添加劑含量表達(dá)方式是：① 微生物細(xì)胞總數(shù)，單位是“億/g或ml”；② 有效菌落形成單位總數(shù)，英文是(colony forming unit，簡(jiǎn)寫cfu)，單位是“億cfu/g或ml”；

     有效菌落形成單位總數(shù)，英文是(colony forming unit，簡(jiǎn)寫cfu)；是指每克產(chǎn)品，經(jīng)過(guò)一定的稀釋后，一般是稀釋1～10億倍左右，再通過(guò)加入玻璃珠在搖床上打散細(xì)菌細(xì)胞，（為了更好地分散微生物細(xì)胞，還有使用超聲水浴處理，便微生物細(xì)胞盡量分散，以便將來(lái)在平板培養(yǎng)基上培養(yǎng)時(shí)，可以得到充分分散開(kāi)的，獨(dú)個(gè)的菌落，并有利于計(jì)數(shù)和觀察）

     再把稀釋好的，并經(jīng)分散的微生物菌懸液，用移液管吸取一定的數(shù)量（一般是0.1～1毫升），涂抹或倒制在平板培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，得到了肉眼可見(jiàn)的，由一個(gè)一個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖而成的菌落，再經(jīng)過(guò)鑒定和計(jì)數(shù)這些菌落，乘以稀釋倍數(shù)，就是檢測(cè)結(jié)果。這個(gè)單位真實(shí)地反映了產(chǎn)品究竟有多少個(gè)活細(xì)菌活細(xì)胞，是最規(guī)范的單位；
      這個(gè)方法的缺陷是檢測(cè)誤差較大，往往造成檢測(cè)結(jié)果偏低，造成結(jié)果偏低的原因有以下幾種：

    ① 細(xì)胞粘結(jié)造成的結(jié)果偏低；

    在檢測(cè)過(guò)程中，存在很大的誤差，比如產(chǎn)品中細(xì)胞往往是粘結(jié)在一起的，使用一般的搖勻方法無(wú)法充分地分散它們，往往在平板培養(yǎng)基上看到的一個(gè)菌落，很有可能是由幾個(gè)細(xì)胞長(zhǎng)成的，所以，在檢測(cè)中必須嚴(yán)格打散粘結(jié)的細(xì)胞，一旦打散操作不當(dāng)，會(huì)造成檢測(cè)結(jié)果偏低，偏低是肯定的，好一些的方法可以用超聲波來(lái)打散，但超聲波可能會(huì)殺死細(xì)胞，所以，往往實(shí)際上產(chǎn)品超過(guò)了200億，但用這種方法檢測(cè)的結(jié)果卻只有120億；目前也有人提出先高溫水浴活化后，再用振蕩器或搖床處理30分鐘，再倒制平板上培養(yǎng)，可以得到比較穩(wěn)定的檢測(cè)效果。 

    ② 由于死細(xì)胞是不會(huì)長(zhǎng)成菌落的，所以，也造成檢測(cè)結(jié)果偏低；

    ③ 還有一些弱小的細(xì)胞，由于處于衰老期，或存在缺陷，也無(wú)法長(zhǎng)成菌落，也造成檢測(cè)結(jié)果偏低；

    即這種菌數(shù)表達(dá)方法的特點(diǎn)是：

    ① 一是檢測(cè)結(jié)果偏低，實(shí)際結(jié)果要高于檢測(cè)結(jié)果；

    ② 二是這種表達(dá)方式是最規(guī)范的，也是將來(lái)國(guó)家可能強(qiáng)制執(zhí)行的方法；

    ③ 三是這種表達(dá)方法檢測(cè)出來(lái)的，可以肯定都是活菌，沒(méi)有死菌，是非常真實(shí)地反映了產(chǎn)品的微生物活力的規(guī)范化的檢測(cè)單位。

 

    這種表達(dá)方法是把死菌活菌都計(jì)數(shù)在內(nèi)，不分死活，往往采用比較簡(jiǎn)單的顯微鏡計(jì)數(shù)法，如血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)方法，比較小的細(xì)菌則采用Helber 細(xì)菌計(jì)數(shù)板來(lái)計(jì)數(shù)，也需要先打散細(xì)胞，再進(jìn)行稀釋處理，以使顯微視野中的細(xì)胞數(shù)在合適的范圍內(nèi)，進(jìn)行數(shù)數(shù)計(jì)數(shù)，再把計(jì)數(shù)結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)即得結(jié)果。

    這種方法的結(jié)果顯然是偏高，因?yàn)椴徽撌撬兰?xì)胞，還是活細(xì)胞都被計(jì)數(shù)在內(nèi)了，而且甚至有一些不是產(chǎn)品規(guī)定的微生物細(xì)胞，如雜菌甚至有害細(xì)菌也被計(jì)數(shù)進(jìn)去了，甚至有一些酷似微生物細(xì)胞的雜質(zhì)也被計(jì)數(shù)進(jìn)去了，所以，得到的結(jié)果比較高，也是目前大多數(shù)企業(yè)樂(lè)于采用的表達(dá)方法；

 

     作為一家規(guī)范化的企業(yè)，我公司采用的是有效菌落形成單位的表達(dá)方式，例如活力99生酵劑的分析保證值是有效菌落形成單位總數(shù)120億cfu/g，當(dāng)然，這只是分析保證值，是企業(yè)為了合理規(guī)避質(zhì)檢部分的監(jiān)督風(fēng)險(xiǎn)而設(shè)定的一個(gè)數(shù)值，也企業(yè)所能達(dá)到的最低數(shù)值，實(shí)際上由于微生物生產(chǎn)的復(fù)雜性，我們所生產(chǎn)的出廠產(chǎn)品，都達(dá)到了220億/g以上的水平，甚至更高，說(shuō)到底，寫在包裝上的只是分析保證值，是為了合理規(guī)避質(zhì)檢監(jiān)督而設(shè)定的數(shù)值而已。

    活力99生酵劑在最近一次的檢測(cè)中，即2010年6月5日號(hào)在江西省飼料質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)站檢測(cè)的結(jié)果是2185×10⁸cfu/g，即每克有2185億個(gè)有效活菌，不僅是活菌，而且是能生長(zhǎng)形成菌活的有效活菌。

 

    飼用酶制劑的含量表達(dá)方式就更為復(fù)雜了，也比較特殊，有生物常識(shí)的人都知道，酶的第一大特性就是專一性，即一種酶只對(duì)一種底物（作用對(duì)象），甚至只對(duì)某一個(gè)化學(xué)鍵才會(huì)起催化分解的作用，這自然而然就反映到酶活力的表達(dá)方式上也應(yīng)該是：不同的酶，其活力單位具有不同的，獨(dú)一無(wú)二的，專一的酶活力表達(dá)方式，換句易懂的話說(shuō)：自然界存在上億種生物酶，如果要給它們定酶活力表達(dá)方式，則也一定存在上億個(gè)不同的酶活力表達(dá)方式。

    舉幾個(gè)例子：

① 植酸酶的活力表達(dá)方式是：待測(cè)樣品在植酸鈉濃度為5.0mmol/L、溫度37℃、pH值5.50的條件下，每分鐘從植酸鈉中釋放1μmol無(wú)機(jī)磷，即為一個(gè)植酸酶活性單位，以U表示。

② 綜合纖維素酶(FPA酶)活力的國(guó)際酶活單位的定義:在最適測(cè)定條件下,每分鐘水解濾紙產(chǎn)生1µmol還原糖（以葡萄糖計(jì)）所需酶量定義為一個(gè)酶活力單位（IU）。

    ③ 木聚糖酶活力的國(guó)際酶活單位的定義:在最適測(cè)定條件下，每分鐘水解木聚糖產(chǎn)生1µmol還原糖（以木糖計(jì)）所需酶量定義為一個(gè)酶活力單位（IU）

……………………………

    所以說(shuō)，不同的酶具有不同的酶活力表達(dá)方式，筆者曾經(jīng)看到過(guò)一家自稱是有n年實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的著名微生物專家開(kāi)辦的企業(yè)，竟然在產(chǎn)品包裝的【主要成分】中，赫然寫著：復(fù)合酶活力≥20000u/克，這是完全違背科學(xué)的外行話，也是極不嚴(yán)肅的，因?yàn)閺?fù)合酶只是一個(gè)概念名詞，只是代表這是一種由多個(gè)酶混合在一起的復(fù)配物，由于不同的酶有各自獨(dú)特不同的酶活力表達(dá)方式，所以，是不能把各種酶的活力進(jìn)行簡(jiǎn)單的數(shù)學(xué)相加的，換句話說(shuō)，復(fù)合酶是無(wú)法用活力單位來(lái)表達(dá)的，或者說(shuō)，復(fù)合酶根本就不存在酶活力表達(dá)方式；由此可見(jiàn)，這家企業(yè)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是假的，因?yàn)榧夹g(shù)標(biāo)準(zhǔn)局在備案時(shí)不可能不知道這點(diǎn)常識(shí)，如果連最基本的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)都是假的，則其他的又如何能讓人相信？

    由于國(guó)家對(duì)常用的酶還沒(méi)有強(qiáng)制性的標(biāo)準(zhǔn)，所以，目前，各酶制劑企業(yè)都是采用的企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，即自己制定標(biāo)準(zhǔn)，這是為什么呢，因?yàn)榧词雇瑯邮墙心揪厶敲福�但不同生產(chǎn)工藝，不同生產(chǎn)菌種來(lái)源的酶，它們?cè)诓煌�的測(cè)定條件下，其活力還是有所不同的，如有的企業(yè)的酶在40℃ 和PH7的檢測(cè)條件下，活力最好，而有的企業(yè)的酶在35℃和PH5的檢測(cè)條件下活力最好，所以，為了達(dá)到最大的活力單位，各企業(yè)都會(huì)根據(jù)自己所生產(chǎn)的酶的特點(diǎn)，來(lái)設(shè)定自己檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)中的最適檢測(cè)條件，以達(dá)到出廠檢測(cè)活力最高。

    所以，您的購(gòu)買某種酶時(shí)，一定要清楚您購(gòu)買它的目的是什么，如您購(gòu)買蛋白酶，要在酸性環(huán)境中來(lái)分解豆粕，則一定要購(gòu)買酸性蛋白酶，不要去購(gòu)買堿性蛋白酶，酸性蛋白酶是在酸性環(huán)境中檢測(cè)活力最高。

    所以，酶制劑的表達(dá)方式的特點(diǎn)是：

    ① 不同的酶，甚至不同來(lái)源的同一種酶，有不同的酶活力表達(dá)方式，即使同樣是叫蛋白酶，也有酸性和堿性的活力表達(dá)方式；

    ② 酶活力的表達(dá)與檢測(cè)條件密切相關(guān)，如溫度、PH值、作用時(shí)間、底物濃度等等。

 

    我公司的粗飼料降解劑的酶活力表達(dá)方式中規(guī)定了

    ① Beta—葡聚糖酶活力表達(dá)方式：在最適測(cè)定條件下，每分鐘水解β—葡聚糖產(chǎn)生1µg還原糖（以葡萄糖計(jì)）所需酶量定義為一個(gè)酶活力單位（u）。

    分析保證值是：50000 u/g

    ② 纖維素酶活性表達(dá)方式：在最適測(cè)定條件下，每分鐘水解CMC—Na產(chǎn)生1µg還原糖（以葡萄糖計(jì)）所需酶量定義為一個(gè)酶活力單位（u）。

    纖維素酶分析保證值：2500 u/g